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蛋白Marker的分類(lèi)
  • 發(fā)布日期:2025-03-24      瀏覽次數:44
    • 蛋白Marker主要分為未預染蛋白Marker和預染蛋白Marker兩種,另外還有一些其他類(lèi)型的蛋白Marker:如顯影蛋白Marker等。

      未預染蛋白Marker:

      是幾種已知分子量并純化好的蛋白質(zhì)預混液。

      非預染蛋白Marker在電泳過(guò)程中看不到,電泳結束后經(jīng)過(guò)蛋白染色后才能起指示作用,無(wú)法在實(shí)驗過(guò)程中起預示作用。

      但是由于蛋白沒(méi)有附帶染料分子或者是標記分子,所示大小正好是蛋白原本的大小,所以最準確。


      預染蛋白Marker:

      是純化好的幾種蛋白,通過(guò)與染料共價(jià)耦聯(lián)后混合在一起,在電泳過(guò)程中或者轉膜時(shí)可以直接觀(guān)察到的一種蛋白Marker。

      預染蛋白Marker又可分為單色預染和多色預染。

      Marker條帶越多參考價(jià)值越大,同時(shí)也越難區分,若用不同顏色則容易辨認;

      單色的Marker通常利用其中某些條帶加倍濃度來(lái)提示其大小。

      預染蛋白Marker在電泳過(guò)程可以起到預示作用,當觀(guān)察目標蛋白大小位置進(jìn)入最佳分辨區時(shí),停止電泳,以得到最佳分辨效果。

      轉膜過(guò)程可以監測轉膜效率,同時(shí)可以在膜上標記蛋白分子量。

      但是,預染蛋白Marker與染料共價(jià)偶聯(lián),在不同的緩沖條件下,電泳遷移特性可能會(huì )發(fā)生某些變化,導致一些偏差。

      也就是說(shuō),預染蛋白Marker條帶代表的是相對大小,而不是絕對大小。


      顯影蛋白Marker:

      顯影蛋白Marker,蛋白條帶中含有IgG結合位點(diǎn),IgG結合位點(diǎn)會(huì )結合用于檢測靶蛋白的一抗或二抗,使得蛋白Marker在印跡膜上可與目的條帶一同呈現。

      通常會(huì )有兩個(gè)預染條帶,便于動(dòng)態(tài)觀(guān)察蛋白質(zhì)電泳狀態(tài),判斷轉膜效果和方向;

      結合抗體后經(jīng)化學(xué)發(fā)光檢測可顯示多個(gè)條帶。


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